利用凍干機制備膠原蛋白海綿，可以解決現(xiàn)有方法制備的膠原蛋白海綿存在生產(chǎn)周期長、產(chǎn)率低、純度低以及止血性能差的問題，而提供了高純度膠原蛋白海綿。

  高純度膠原蛋白海綿的制備方法，按以下步驟進行:

  一、新鮮的牛跟腱預(yù)處理

  二、膠原蛋白的提取

  三、離心:將提取液進行冷凍離心，離心機溫度為-5~5°C，轉(zhuǎn)速為10000~15000轉(zhuǎn)/分，離心20~30min，取離心的上層清液；

  四、鹽析-->溶解；

  五、梯度透析:①將溶解的膠原溶液裝入截留分子量為五萬的透析袋中，在磁力攪拌下首先用質(zhì)量濃度為1.5%~3%的乙酸做透析外液，透析24h，12h后換一次透析外液；其次用質(zhì)量濃度為0.3%~1.2%的乙酸做透析外液，透析24h，12h后換一次透析外液；最后用質(zhì)量濃度為0.08%~0.2%的乙酸做透析外液，透析24h，12h換一次透析外液；

  ②將透析完的膠原溶液取出裝入截留分子量為一萬的透析袋中，在磁力攪拌下用蒸餾水做透析外液，每12h換一次蒸餾水，直至透析外液用硝酸銀溶液檢測沒有沉淀產(chǎn)生為止，獲得透析好的膠原溶液，整個透析過程都在室溫下進行，透析外液的體積為內(nèi)液的8~12倍；七、預(yù)凍:將透析好的膠原溶液注入不銹鋼盤模具中，然后室溫下靜置脫泡5~IOh,再放入低溫冰箱中采用程序降溫，降溫速度為10°C /H,從常溫降溫至-50°C~_80°C并預(yù)凍12~24h，獲得預(yù)凍好的膠原溶液；

  六、冷凍干燥:將預(yù)凍好的膠原溶液放入上海田楓TF-SFD-3凍干機中，真空干燥36~72h，獲得冷凍干燥成型的高純度膠原蛋白海綿；

  七、滅菌:將冷凍干燥成型的高純度膠原蛋白海綿裝入鋁箔袋中，用封口機封口，然后用6tlCo進行輻照滅菌，即完成高純度膠原蛋白海綿的制備.

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